[إين ستث] [بكر]
تعريف من [بكر] [إين ستث]
[بكر] [إين ستث] ([إيش]) [بولمرس] [شين ركأيشن] أنّ واقعيّا يتمّ في الخلية على منزلق. موضعيّة [بكر] تضخيم يستطيع كنت أنجزت على ثابت نسيج أو خلايا.
![[بكر] موضعيّة](http://www.pcrstation.com/images/in-situ-pcr.jpg)
[إين ستث] [بكر] تقييم
أثناء الإستهلال وتقدّم المرض, كميات دقيقة من منتوج في السّكان صغيرة خلايا أو نساج يمكن كنت حيويّ لالتولّد مرض من المرض.
في كثير [سلوول-فولفينغ] مرض أيّ يتطلّب شهور [أر فن] سنون أن يبديبنفسي سريريّا, أبديت هو يتلقّى يكون أنّ الأغلبية من ال يتأثّر خلية السّكان في دولة غير فعّال [ترنسكريبأيشنلّي], وفي [ا لفل] من واحدة مورث لكلّ [هوست سلّ].
[نوكليك سد] تهجين استخدمت طرق وال [بولمرس] [شين ركأيشن] ([بكر]) يتلقّى كلا يكون أن يفحص التعبير وكشف من هذا يتأثّر مورث أثناء تولّد مرض. بينما كلا هذا تقنيات يكونون الى حدّ بعيد مفيدة, السيئة من هذا تقنيات أنّ يوصل هم أساسا خلية تعبير والسّكان دراسات. [نوكليك سد] عزلت من السّكان الخلايا أيّ يحتوي إمّا رقم كاف جزيء أن يكشف مباشرة بمعياريّة تهجين تقنيات, أو, عندما يحتوي [سوببوبولأيشن] مثل بعض بما أنّ [سنغل كبي] ال [نوكليك سد], أنّ جزيء يضخّم ب ال [بكر], ويكشف بعد تضخيم.
يطبّق تهجين موضعيّة ([إيش]) المنهجيّة من ال [نوكليك سد] تهجين تقنية إلى المستوى خلويّ. يضمّ [ستوشميستري] و [إيمّونوستوشميستري], يسمح [بكر] [إين ستث] التحقّق من علامة خلويّ أن يكون عيّنت, وأبعد يسمح التحديد مكان من إلى خلية تسلسل خاصّ ضمن خلية السّكان, مثل نساج ودم عينات.
حدّدت [بكر] [إين ستث] إلى الكشف من مادة [نون-جنوميك] مثل [رنا], مورث أو جينات, بما أنّ ال [دتكأيشن ليميت] في كثير شروط يكون عدّة نسخ من الهدف [نوكليك سد] لكلّ خلية. لذلك, واجبة إلى نسخة رقم تحديد, تهجين ال [رنا] أكثر حسّاسة من [دنا] كشف.
يتضمّن عاملات يأثر [إين ستث] [بكر] حساسيّة:
1) ال [سترنددنسّ] من الهدف جزيء
2) الافتقار من تسلسل متمّم الأقرب إلى الهدف تسلسل
عكست [ترنسكريبتس-كتلزد] نسخة تسجيل موضعيّة يتلقّى حتّى يكون استعملت أن يكشف [رنس] أيّ يقع في عامّة نسخة رقم نسبيّا.
[إين ستث] [بكر] ([إيش]) [بروتكل]
في البداية يجعل القياس اتّحاد عنصر من ال [نوكليك سد] عناصر الردّ فعل [بريمر-دريفن]. بما أنّ الردّ فعل يباشر مهما, ال [بكر] يبدأ منتوج بنفسي أن يعمل كهدف لتضخيم بعيدة, [أس ولّ س] كبسولة تفجير لاستطالة بعيدة. هو التراكم التسلسل يطال في يتعدّد ردّ فعل أيّ يكون احتبست بالخلية ثابت ويتصرّف كالهدف للتحقيق [رديولبلد] في الكشف طوي.
يعرقل الطبيعة معقّدة طبيعيّ ضمن خلية ثابت على حدّ سواء الفعالية من ال [بولمرس] [أس ولّ س] انتشار و [أنّلينغ], ولذلك استطالة أوقات كثير طويلة من أنّ يوصل تحت مادّيّة (معياريّة [بكر]) شروط. [برودوكتد] إشارة أمثل عادة يستعمل 15 استطالة دقيقة.