Genistetes PCR
Genistetes PCR
Definition genisteten PCR:
Genistetes PCR ist eine Veränderung der Polymerasekettenreaktion (PCR), dadurch, daß zwei Paare (anstelle von einem Paar) PCR Zündkapseln benutzt werden, um ein Fragment zu verstärken.
Das erste Paar der PCR Zündkapseln verstärken ein Fragment, das einem Standard-PCR ähnlich ist. Jedoch nannte ein zweites Paar Zündkapseln genistetes Innere Bindung der Zündkapseln (wie sie liegen /.are, das innerhalb des ersten Fragments genistet wird), das erste PCR Produktfragment, um Verstärkung eines zweiten PCR Produktes, das kürzer, als ist das erste zu erlauben.
Der Vorteil genisteten PCR ist, daß, wenn das falsche PCR Fragment verstärkt wurde, die Wahrscheinlichkeit ziemlich niedrig ist, die die Region ein zweites Mal durch den zweiten Satz der Zündkapseln verstärkt würde. So ist genistetes PCR eine sehr spezifische PCR Verstärkung.
Die Genistete PCR Reaktion
Genistetes PCR erfordert zwei Sätze Zündkapseln, die benutzt werden, um ein spezifisches DNA Fragment mit zwei verschiedenen Durchläufen von PCR zu verstärken. Das zweite Paar der Zündkapseln arbeiten, um ein kleineres Besondere DNA Fragment zu verstärken, das innerhalb des ersten PCR Produktes gelegen ist.
Genistetes PCR Reaktion Diagramm
Schritte des genisteten PCR
Schritt Einer: Die DNA Zielschablone wird durch den ersten Satz der Zündkapseln gesprungen, die im Blau gezeigt werden. Die Zündkapseln können an Alternative, verbindliche Aufstellungsorte der ähnlichen Zündkapsel binden, die mehrfache Produkte jedoch nur eins dieser PCR Produkte geben die beabsichtigte Reihenfolge geben (die mehrfachen Produkte nicht gezeigt).
Schritt Zwei: PCR Produkte von der ersten PCR Reaktion werden einem zweiten PCR unterworfen jedoch, das mit einem zweiten neuen Satz Zündkapseln laufen gelassen wird, die im Rot gezeigt werden.
Während diese Zündkapseln innerhalb des ersten PCR Produktes GENISTET werden, bilden sie es sehr unwahrscheinlich, daß non-specifically verstärktes PCR Produkt verbindliche Aufstellungsorte für beide Sätze Zündkapseln enthalten würde. Diese genistete PCR Verstärkung stellt sicher, daß das PCR Produkt von der zweiten PCR Verstärkung wenig oder keine Verschmutzung von non-specifically verstärkten PCR Produkten von den alternativen Zündkapselzielreihenfolgen hat.
Genistetes PCR Protokoll
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Genistetes PCR: Publikationen
Das Verwenden der genisteten RT-PCR Analysen, um das Vorherrschen von Vogelgrippe V festzustellen... bezog Artikel
Mit nistete RT-PCR Analysen, um das Vorherrschen der Vogelgrippeviren in den passerines in Westslowakei, während Sommers 2007 festzustellen.
Scand J Stecken Dis An. Sept 2008 5;:1-4
Autoren: Gronesova P, Kabat P, Trnka A, Betakova T
Das Vorherrschen des Vogelgrippevirus (AIV), zusammen mit der Verteilung der unterschiedlichen AIV Formationsglieder, wurde in den wandernden Wasservögeln und terrestrischen in den Vögeln studiert, die in Westslowakei während Sommers 2007 verfangen wurden. wurden oropharyngeal und cloacal Putzlappen gesammelt. Siebung der Proben deckte auf, daß 18% von oropharyngeal und 18% von cloacal Proben für AIV positiv waren. Proben vom Mundrachen und von der Kloake waren in nur 6.6% von Fällen positiv. Eine Gesamtmenge von 10 unterschiedlichen Formationsgliedern des Hämagglutinins (H2, H3, H4, H6, H7, H9, H10, H11, H12 und H13) und von 4 unterschiedlichen Formationsgliedern der Neuraminidase (N1, N2, N3 und N5) wurden in 32 Proben von dieser Position ermittelt. Die reichlich vorhandensten Formationsglieder von ha in den Proben waren H12 und H9 (25% je), gefolgt von H11 und von H10 (15% je) und H13 (9%). Es gab 3 Fälle, in denen unterschiedliche AIV Infektion in den oropharyngeal und cloacal Proben ermittelt wurde, die vom gleichen Vogel entstehen (H13N1 und H12N5; H13N3 und H9N5; H10N2 und H9N5 im Mundrachen und in der Kloake, beziehungsweise).
PMID: 18777249 [ PubMed - wie vom Verleger geliefert ]