AFLP PCR
Fond d'AFLP PCR
Le polymorphisme amplifié PCR de longueur de fragment, également appelé AFLP PCR a été à l'origine décrit par Zabeau et autres, 1993.
AFLP se compose de 3 étapes :
1-A) L'ADN cellulaire est digérée avec des une ou plusieurs enzymes de restriction. Typiquement ceci comporte une combinaison de deux enzymes de restriction : un coupeur 4 bas (MseI) et un coupeur 6 bas (EcoRI).
1b) Ligature des éditeurs de liens (adapteurs spécifiques d'moitié-emplacement de restriction) à tous les fragments de restriction.
2-A) PCR présélectif est exécuté à l'aide des amorces qui assortissent les éditeurs de liens et les ordres de détail d'emplacement de restriction.
2-B)
3) séparation et amplicons électrophorétiques sur une matrice de gel, suivie de la visualisation du modèle de bande. Le but de cet outil est exécuter une expérience théorique d'AFLP-PCR en employant les mêmes principes, et de suggérer les adapteurs et les amorces requis dans l'expérience.
Applications d'AFLP PCR
AFLP est une méthode extrêmement sensible de PCR-based pour détecter des polymorphismes en ADN. AFLP peut être également employé pour genotyping des individus pour un grand nombre de lieux en utilisant un nombre minimal de réactions de PCR.
Protocole d'AFLP PCR
Références d'AFLP PCR
Vos et autres 1995. AFLP : une nouvelle technique pour l'empreinte digitale d'ADN. Recherche 23 D'Acides Nucléiques : 4407-14.