ACP en temps réel
ACP EN TEMPS RÉEL : Une introduction
Bien que les méthodes traditionnelles de doser l'ADN messagère soient assez bonnes comme le transfert de Northern et l'hybridation in situ, elles n'approchent pas la facilité et la vitesse de l'ACP en temps réel.
RT-PCR ou ACP renversé de transcriptase doit semi-quantitatif devoir charger des échantillons sur un gel et l'insensibilité du bromure d'éthidium. Ainsi, l'ACP en temps réel a été développé hors de la nécessité de doser des différences dans l'expression d'ADN messagère d'une façon facile et rapide, et en raison de la nécessité d'utiliser d'un peu d'ADN messagère de ce type a obtenu par de petits échantillons de tissu, et LCM (microdissection de saisie de laser) a isolé des cellules.
(Droite) l'ACP renversé-transcriptase en temps réel est différent de l'autre ACP quantitatif car il dose la quantité initiale du descripteur au lieu de détecter la quantité de produit amplifié final (Freeman, 1999 ; Raeymaekers, 2000).
L'ACP en temps réel est caractérisé par le moment pendant le recyclage où l'amplification du produit d'ACP d'intérêt est d'abord détectée plutôt que la quantité du produit d'ACP d'intérêt qui est accumulé au point final après l'ACP qui a contenu un grand nombre de cycles. L'ACP en temps réel fait ceci en surveillant la quantité de fluorescence émise pendant la réaction d'ACP, et ceci agit en tant qu'indicateur de la quantité d'amplification d'ACP qui se produit pendant chaque cycle d'ACP. Ainsi, dans de plus nouvelles machines d'ACP de temps réel, on peut visuellement voir le progrès de la réaction dans le « temps réel ».
L'ACP en temps réel a également une dynamique beaucoup plus large du fois jusqu'à 107 (comparé à fois 1000 dans RT-PCR conventionnel). La dynamique d'une analyse détermine combien la concentration de cible peut varier mais toujours être mesuré. Cette dynamique large a également comme conséquence une quantitation plus précise.