AFLP PCR
Priorità bassa di AFLP PCR
Il polimorfismo amplificato PCR di lunghezza del frammento, anche denominato AFLP PCR originalmente è stato descritto da Zabeau ed altri, 1993.
AFLP si compone di 3 punti:
1-A) Il DNA cellulare è digerito con uno o più enzimi di limitazione. Questo coinvolge tipicamente una combinazione di due enzimi di limitazione: 4 una taglierina bassa (MseI) e 6 una taglierina bassa (EcoRI).
1-B) Ligation dei linkers (adattatori specifici del metà-luogo di limitazione) a tutti i frammenti di limitazione.
2-A) PCR preselettivo è effettuato per mezzo degli iniettori che abbinano i linkers e le sequenze specifiche del luogo di limitazione.
2-B)
3) separazione ed amplicons elettroforetici su una tabella del gel, seguita da visualizzazione del modello della fascia. Lo scopo di questo attrezzo è di effettuare un esperimento teorico di AFLP-PCR usando gli stessi principii e suggerire gli adattatori e gli iniettori stati necessari nell'esperimento.
Applicazioni di AFLP PCR
AFLP è un metodo altamente sensibile di PCR-based per la rilevazione dei polimorfismi in DNA. AFLP può anche essere usato per genotyping gli individui per tantissimi luoghi usando un numero minimo di reazioni di PCR.
Protocollo di AFLP PCR
Riferimenti di AFLP PCR
Vos ed altri 1995. AFLP: una nuova tecnica per impronta digitale del DNA. Ricerca 23 Degli Acidi Nucleici: 4407-14.