実時間PCR

実時間PCR

実時間PCR : 導入

mRNA を量的に表わす従来の方法が北にしみが付くこと及びそのままの交配のようなかなりよいが、実時間PCR の容易さそして速度に近づかない。

RT-PCR か逆のtranscriptase PCR はゲルでサンプルおよびethidium 臭化物の無感応に荷を積む必要性のために半定量的である。従って、実時間PCR は容易で、速い方法のmRNA の表現の相違を量的に表わす必要性から開発されそれらのようなmRNA の少量の使用する小さいティッシュサンプルによって必要性のために得、LCM (レーザーの捕獲のmicrodissection) は細胞を隔離した。

  実時間逆transcriptase の(RT) PCR は最終的な増幅されたプロダクト(Freeman 1999 年の量を検出するかわりに型板の最初の量を量的に表わすように他の量的なPCR と異なっている; Raeymaekers 、2000) 。

  実時間PCR は興味の PCR プロダクトの拡大が最初によりもむしろ多数の周期を含んでいたPCR の後のエンドポイント で集まる興味のPCR プロダクトの量検出される循環の間の時間のポイントによって特徴付けられる。  実時間PCR はPCR の反作用の間に出る蛍光性の量の監視によってこれをしこれは各PCR 周期の間に起こるPCR の拡大の量の表示器として機能する。  従って、より新しいリアルタイムPCR 機械で、1 つは視覚で"リアルタイム" の反作用の進歩を見ることができる。

  実時間PCR にまた大いに広いダイナミックレンジがまでの107 折るある(と比較されて慣習的なRT-PCR で1000 折りなさい) 。試金のダイナミックレンジは集中目標がことができる今までのところではまだ量を示されるためにかどの位定める変える。この広いダイナミックレンジはまたより正確なquantitation で起因する。