연쇄 반응 격렬한
출발PCR-HotStart폴리메라이제.
격렬한 출발PCR: 소개
격렬한 출발PCR은PCR반응 준비동안에 폴리메라이제 활동의 금지를 허용한다. 순환하는PCR보다 전에 폴리메라이제 활동을 제한해서, 격렬한 출발PCR은 일반적인 확대를 감소하고PCR제품 표적 수확량을 증가한다.
격렬한 출발PCR은taq지시된 항체에 의하여 포함하는 화학 수정, 밀초를 바르 방벽 방법, 및 금지를 사용해서 일반적으로 실행한다.
폴리메라이제PCR또는 폴리메라이제 연쇄 반응은Taq효소,eubacterial유형iDNA폴리메라이제, 및Pfuthermostable유기체에서 고립시킨DNA폴리메라이제 의archaeal유형을BDNA이용한다.
PCR은 저온에 고열, 뇌관을 단련하고기, 그리고 중간 온도에 그때 폴리메라이제 연장을 허용하기에 녹는DNA의 다각 주기에 의하여DNA을 증폭한다. 불운하게, 이thermophilicDNA폴리메라이제는 실험의 집합동안에 실내 온도에 아주 작은 그러나 잴 수 있는 폴리메라이제 활동을 보인다.
어떤 단련한3'끝의 연장이 이DNA폴리메라이제 활동에 의하여 촉매 작용을 미칠 것이다. PCR확대다음에, 유래 제품은 명확한 일반적인 악대의 혼합물을 포함한다. 더욱,5'-3'DNApolymerasel의exonuclease활동 부분적으로 단련한 핵산의 어떤 자유로운 5개의'끝을 타락해, 폴리메라이제 반응의 뇌관과 템플렛 기질을 파괴한. 이것은 원한pcr제품의 더 낮은 수확량안에 유래한다.
격렬한 출발PCR: 간행물
열Activatable은dNTPs을3'변경했다: 격렬한 출발PCR을 위해 종합 그리고 신청. 관계있는 기사
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핵산SympSer(Oxf). 2008;(52):259-60
저자: Koukharevai,HaoqiangH,YeeJ,ShumJ, 폴N,HogrefeRI,LebedevAV
몇2'-deoxyribonucleoside5'3인산염의3'에테르와3'에스테르 유래물은 (dNTPs) 준비되었다. 이dNTP유래물은DNA폴리메라이제를 위해 기질이 아니고 이고지 않 실내 온도에 뇌관 연장을 지원하지 않았다. 그런데,PCR완충기안에C95도에 짧은 미리 데우기에 의하여, 이3'변경한dNTPs은 능률적으로PCR확대를 지원하는 해당 변경하지 않는 자연적인dNTPs으로 개조될 수 있는다. 3'변경한dNTPs에 얻는 더 높은amplicon수확량의 결과로PCR제품의 분석은PCR성과안에 뜻깊은 개선을 계시하고 떨어져 표적 제품의 대형을 감소했다 (관리정보체계 프라이밍과 뇌관 이합체). 공부한3'변경한dNTPs사이에,3'-tetrahydrofuranyl유래물은 제일 결과를 보였다.
PMID: 18776352[PubMed- 과정안에 -]