반대PCR
반대PCR 배경
반대PCR은 또한IPCR을 부르고,Ochman그 외 여러분에의해1988년 (1)안에 첫째로 기술되었다.
표준PCR의 제한은 관심사의
너의DNA파편의5'과3'측면에 서는 지구가 있있
한다 고 이다. 너는 단 1개의 내부 순서의
정보가 있을 때 반대PCR은 너를PCR을 지휘하는
허용한다.
표적DNA의 단 1개의 내부 순서가 있있을 때 반대 폴리메라이제 연쇄 반응은PCR의 이체 이고, 사용된다. 그런 까닭에genomic삽입의 측면에 서는DNA순서를 확인하기안에 아주 유용하다. 다른PCR방법에 유사한, 반대PCR은DNA폴리메라이제을 사용하여 표적DNA을 증폭한다.
흔한 오리엔테이션의 역 방향안에
뇌관을 동쪽으로 향하게 해 달라고 한다
그런데, 반대PCR은 표준PCR(폴리메라이제
연쇄 반응)을 사용한다. 반전 뇌관을 위해
템플렛은 원형을 형성하기 위하여
자체적으로에 잡아맨 금지 파편 이다.
반대PCR방법
반대PCR방법은 금지 언d온읒러앗어에의해 자르는DNA에 일련의 소화 그리고 각자 결찰을 포함한다. 이 커트는 불명한 순서의 어느 것이든 말에 있있던 순서안에 유래한다.
반대PCR은 족답한다
1) 표적DNA은 금지 언d온읒러앗어
소화에의해 몇kilobases의 더 작은 파편으로
가볍게 자른다.
2) 각자 결찰은 개혁하는 인산염 등뼈를
일으키는 원인이 되는 낮은 농도의 밑에 유도된다.
이것은 원형DNA결찰 제품을 준다.
3) 표적DNA은 그때 알고있은 언d온읒러앗어에
소화되는 금지 이다. 이것은 있있던 끝 순서에
선형 제품을 생성하는 있있던 내부
순서안에 커트를 생성한다.
이것은PCR(폴리메라이제 연쇄 반응)을 위해
지금 사용될 수 있는다.
4) 표준PCR은 지금 있있던 내부 순서에
무료한 뇌관에 지휘된다.
개요안에:
있있던 순서를 측면에 서는 순서를 복제하기 위하여 반대PCR은 작용한다. 원형DNA을 생성하기 위하여 측면에 서는DNA순서는 소화되고 그때 잡아맨다.
측면에 서는 순서를 증폭하기 위하여
있있던 순서에서 멀리 조준하는PCR뇌관은 그때
채택한다.
반대PCR의 신청
반대PCR에는transposable성분을 측면에 서는 순서의 확대 그리고 식별을 포함하여 분자 생물학안에 수많은 신청, 및genomic삽입의 식별이 있는다.
반대PCR의정서
반대PCR참고
1. OchmanH,Gerber것과
같이,HartlDL. 유전학. 1988Nov;120(3):621-3.