PCR대청소
PCR대청소 배경
너가 처음에 너의PCR을 낙관하면 좀더, 보다 적게 이을 것이다 엄격할 지점pCR대청소 방법을 위해 너의 필요, 일반적으로.
너의 직접적인 연속을 실행하는것은PCR상태가 잘 낙관되면, 너의 추가된 뇌관 및dNTP's의지의 최대량은pcr확대동안에 위로 사용된다, 따라서 단 아주 몇몇 방해 요인 있고 가능할지도 모른다. 너가 가면TOPO클로닝 벡터로 너의PCR파편을 이하 복제하십시요, 그때 너는 너의 젤에 보이는 단 1개의 중요한PCR악대가 있는것을 필요로 한다. 너는 다각 악대가 있으면, 너는 너의PCR상태를 첫째로 낙관하기 위하여 확인한다.
PCR제품은 확대다음에 너의PCR제품높은 쪽으로 청소하라고 흔하게 추천된다 그런데 정확한 연속 자료, 그것을 얻는 연속보다 전에 순화된것을 필요로 하지 않는다.
너가 과량 뇌관 총계를 추가하나 뇌관이 사용되지 않으면, 이 뇌관은 불가능한 자료 해석을 곤란한 그렇지 않으면 연속을 만들l 수 있는 염색하 레테르를 붙인 연속 파편의 추가 세트의 발생의 결과로 연속동안에 연장 뇌관으로, 행동할 수 있는다.
정화의 질을 시험하기 위하여 지점 대청소PCRprducts은 아g아r옷어 젤에 달려야 한다. 바르나 다각 악대가 출석하면, 제품 얼룩, 너는 흔하게obatin고품질 순서 자료.
파편의 젤 정화는 낮은 녹 온도 아g아r옷어을 사용하여 달성될 수 있는다. 너는 면도칼에UV빛의 밑에 너의 악대를 제거할 수 있고, 완충기/란을 사용하여electroelution또는 젤 적출 방법을 사용하여 조각에서DNA을 추출한다.
연속 복제하기를 위해PCR대청소
과잉dNTPs을, 합병되지 않는 뇌관 제거하기 위하여는 및 일반적인PCR제품 너는 몇 방법을 이용할 수 있는다.
QiagenPCR정화 장비와 다른PCR대청소 장비.
너는 또한 뇌관을 제거할 수 있고 아g아r옷어에PCR제품을 만기가 되고기, 악대를 자르고기와Qiagen젤 정화 장비을 사용하여 아g아r옷어 젤에서DNA적출을 지휘해서dNTPs은 교질화한다.
PCR대청소다음에
어떤PCR대청소 방법다음에, 너는PCR제품의 질 그리고 양을 설치해야 한다. 너는DNA농도 감적과 함께 아g아r옷어 젤electrophoreiss을 사용하여 견본을 달려서 이것을 할 수 있는다.
너는 또한UV분광 광도계을 사용하여DNA의 양을 견적할 수 있는다.