실시간 PCR
실시간 PCR: 소개
mRNA를 quantitating의 전통적인 방법이 북부 더럽히는 및 제자리 교잡과 같은 상당히 좋더라도 실시간 PCR의 용이함 그리고 속도에 접근하지 않는다.
RT-PCR 또는 반전 transcriptase PCR는 젤에 견본 및 ethidium 평범한 사람의 무신경을 적재할 필요가 있게 semi-quantitative 예정이다. 따라서, 실시간 PCR는 쉽고 빠른 방법에 있는 mRNA 표정에 있는 다름을 quantitate 필요에서 개발되고, 그들과 같은 mRNA의 적은 양의 사용하는 작은 조직 추출에 의하여 필요 때문에 얻고 LCM (레이저 붙잡음 microdissection)는 세포를 고립시켰다.
실시간 반전 transcriptase (RT) PCR는 마지막 증폭되는 제품 (Freeman 1999년 양 검출 대신에 템플렛 처음 양을 quantitates 때문에 다른 양이 많은 PCR와 다르다; Raeymaekers 2000년).
실시간 PCR는 관심사의 PCR 제품의 확대가 많은 주기를 포함한 PCR 후에 종점에 누적되는 관심사의 PCR 제품 양 보다는 오히려 첫째로 검출되는 순환 도중 때 맞추어 점이 특징이다. 실시간 PCR는 PCR 반응 도중 방출된 형광 양을 감시해서 이것을 하고, 이것은 각 PCR 주기 도중 생기는 PCR 확대 양의 지시자로 작동한다. 따라서, 더 새로운 즉시 PCR 기계에서, 사람은 시각적으로 "즉시"에 있는 반응의 진도를 볼 수 있다.
실시간 PCR에는 또한 매우 광동적 범위가까지의 107 접힌다 있다 (에 비교해 전통적인 RT-PCR에서 1000 접히십시오). 분석실험의 역학 범위는 표적 농도가 수 있는지 얼마를 그럼에도 불구하고 아직도 양이 정해지기 위하여 결정한다 변화할. 이 광동적 범위는 또한 더 정확한 quantitation 귀착된다.