PCR AFLP
Pcr AFLP Achtergrond
Vergrote PCR van het Polymorfisme van de Lengte van het Fragment, werd ook genoemd PCR AFLP oorspronkelijk beschreven door Zabeau et al, 1993.
AFLP is samengesteld uit 3 stappen:
1-a) Cellulaire DNA wordt verteerd met één of meerdere beperkingsenzymen. Typisch impliceert dit een combinatie van twee beperkingsenzymen: een 4 basissnijder (MseI) en een 6 basissnijder (EcoRI).
1-B) Afbinding van linkers (beperkings helft-plaats specifieke adapters) aan alle beperkingsfragmenten.
2-a) Preselectieve PCR wordt uitgevoerd gebruikend inleidingen die de linkers en beperkingsplaats-specifieke opeenvolgingen aanpassen.
2-B)
3) Elektroforetische scheiding en amplicons op een gelmatrijs, die door visualisatie van het bandpatroon wordt gevolgd. Het doel van dit hulpmiddel is een theoretisch experiment uit te voeren aflp-PCR door de zelfde principes te gebruiken, en de adapters en de inleidingen voor te stellen nodig in het experiment.
Toepassingen van PCR AFLP
AFLP is een hoogst gevoelige op pcr-Gebaseerde methode om polymorfisme in DNA te ontdekken. AFLP kan ook voor het genotyping van individuen voor een groot aantal plaatsen worden gebruikt gebruikend een minimaal aantal PCR reacties.
Pcr AFLP Protocol
Pcr AFLP Verwijzingen
Vos et al 1995, AFLP: een nieuwe techniek voor DNA-vingerafdrukken. Onderzoek 23 van nucleic Zuren: 4407-14.