Verzend deze pagina naar een vriend

Soorten PCR

• PCR AFLP
• Pcr van Alu
• Asymmetrische PCR
• Pcr van de kolonie
• Hete PCR van het Begin
• Pcr in situ
• Omgekeerde PCR
• Lange PCR
• Samengestelde PCR
• Genestelde PCR
• Het optimaliseren van PCR
• Pcr het Klonen
• Pcr Schoonmaakbeurt
• Pcr in real time
• Rechts-PCR
• Standaard PCR
• Pcr van Touchdown

Pcr Middelen

• De Hulpmiddelen van het Ontwerp van de inleiding
• Het Ontwerp van de inleiding
• Pcr Bio-informatica en Gegevensbestanden
• Pcr Protocollen
• Leer over PCR
• Pcr Producten en Verkopers
• Adverteer/contacteer ons

Hete PCR van het Begin: Een Inleiding

  Hete PCR van het Begin staat de remming van polymeraseactiviteit tijdens PCR reactievoorbereiding toe. Door polymeraseactiviteit te beperken voorafgaand aan PCR het cirkelen, Hete vermindert PCR van het Begin niet-specifieke versterking en verhoogt PCR de opbrengst van het productdoel.

 Hete PCR van het Begin wordt algemeen uitgevoerd door inbegrepen chemische wijzigingen, was-barrière methodes, en remming door een taq-geleid antilichaam te gebruiken.

 Pcr of de polymerasekettingreactie gebruiken de polymerase van DNA die van thermostable organismen zoals het enzym Taq, een eubacterial type I de polymerase van DNA, en Pfu, een archaeal polymerase van typeB DNA werden geïsoleerd.

 Pcr vergroot DNA door veelvoudige cycli van smeltende DNA bij inleidingen op hoge temperatuur, onthardende bij een lagere temperatuur, en dan het toestaan van polymeraseuitbreiding bij een middentemperatuur.  Jammer genoeg, tonen deze thermophilic polymerase van DNA een zeer kleine maar meetbare polymeraseactiviteit bij kamertemperatuur tijdens assemblage van het experiment.

 Deze inefficiënte de polymeraseactiviteit zal van DNA de uitbreiding van om het even welke ontharde 3 ' einden katalyseren. Na PCR versterking, bevat het resulterende product een mengsel van specifieke en niet-specifieke banden. Voorts degraderen 5'-3 ' exonucleaseactiviteit van DNA polymerasel om het even welke vrije 5 ' einden van gedeeltelijk ontharde nucleic zuren, die de inleiding en malplaatjesubstraten van de polymerasereactie vernietigen. Dit resulteert in een lagere opbrengst van het gewenste pcr product.

Hete PCR van het Begin: Publicaties

Hitte activatable 3'-gewijzigde dNTPs: synthese en toepassing voor hete beginpcr. Verwante Artikelen

Hitte activatable 3'-gewijzigde dNTPs: synthese en toepassing voor hete beginpcr.

Nucleic Zuren Symp Ser (Oxf). 2008;(52):259-60

Auteurs: Koukhareva I, Haoqiang H, Yee J, Shum J, Paul N, Hogrefe RI, Lebedev AV

Verscheidene 3'-ether en de 3'-ester derivaten van 5'-trifosfaat 2'-deoxyribonucleoside (dNTPs) werden voorbereid. Deze derivaten dNTP waren geen substraten voor de polymerase van DNA en steunden inleidings geen uitbreiding bij kamertemperatuur. Nochtans, door plotseling aan 95 graden van C in PCR buffer voor te verwarmen, kunnen deze 3'-gewijzigde dNTPs in het corresponderen ongewijzigde natuurlijke dNTPs worden omgezet die PCR efficiënt versterking steunen. De analyse van PCR producten die met 3'-gewijzigde dNTPs wordt verkregen openbaarde een significante verbetering van PCR prestaties resulterend in hogere ampliconopbrengst en verminderde vorming van van-doelproducten (mis-klaarmaakt en inleidingsdimeer). Onder bestudeerde 3'-gewijzigde dNTPs, toonden de derivaten 3'-tetrahydrofuranyl de beste resultaten.

PMID: 18776352 [ PubMed - in proces ]

Pcr van het auteursrecht 2006-2007 Post