AFLP PCR
Fundo de AFLP PCR
O polymorphism amplificado PCR do comprimento do fragmento, chamado também AFLP PCR foi descrito originalmente por Zabeau et por al., 1993.
AFLP é composto de 3 etapas:
1-A) O DNA celular é digerido com um ou mais enzymes da limitação. Tipicamente isto envolve uma combinação de dois enzymes da limitação: um cortador 4 baixo (MseI) e um cortador 6 baixo (EcoRI).
1-B) Ligation dos linkers (adaptadores específicos do metade-local da limitação) a todos os fragmentos da limitação.
2-A) PCR pre-selective é executado usando os primers que combinam os linkers e as seqüências do específico do local da limitação.
2-B)
3) separação e amplicons electrophoretic em uma matriz do gel, seguida pelo visualisation do teste padrão da faixa. O alvo desta ferramenta é executar uma experiência teórica de AFLP-PCR usando os mesmos princípios, e sugerir os adaptadores e os primers necessitados na experiência.
Aplicações de AFLP PCR
AFLP é um método altamente sensível de PCR-based para detectar polymorphisms no DNA. AFLP pode também ser usado genotyping indivíduos para um grande número loci usando um número mínimo de reações de PCR.
Protocolo de AFLP PCR
Referências de AFLP PCR
Vos et al. 1995. AFLP: uma técnica nova para o fingerprinting do DNA. Pesquisa 23 Dos Ácidos Nucleic: 4407-14.