PCR Problems PCR Problemas
PCR Problems and Solutions PCR problemas e soluções
Problem: Problema:
PCR Contamination PCR Contaminação
PCR contamination is caused by DNA samples which PCR contaminação é causada por amostras de DNA que
Solutions to PCR contamination: Soluções para PCR contaminação:
Use Zero Aerosol Pipette Tips. Aerossol Sugestões pipeta uso zero.
Prepare fresh new autoclaved water. Prepare novos autoclavado água fresca.
Primer Dimers Primer dímeros
Primer dimers are caused by lack of binding of the primers to the template due to inefficient primer annealing to the template due to Primer dímeros são causados pela falta de ligação dos primers para o modelo devido à ineficiência primer annealing para o modelo devido a
Higher affinity binding of the primers to each other or themselves also causes primer dimers. Maior afinidade vinculativa dos primers para si próprios ou ainda causas primer dímeros.
Primer dimers are seen as major band which migrates at less than 100bp on an agarose gel. Primer dímeros são vistos como grandes bandas que migra pelo menos, 100bp em um gel agarose.
Solutions to Primer Dimer Formation: Soluções para Primer Dímeros Formation:
Optimize annealing temperature Otimizar annealing temperatura
Design new primers which have lower self-annealing or self-hybridization potential. Design novo primers que têm menor auto-annealing ou auto-hibridação potencial.