Conditions and Factors Affecting PCR Услови и фактори који утичу на ПЦР
Factors Affecting PCR: Фактори који утичу на ПЦР:
PCR Reaction Volume ПЦР реакција јачине
If you are increasing the PCR reaction volume proportionally to a PCR reaction that is optimized or works well, in general you will increase the amount of product with increasing volume. Ако се повећава ПЦР реакције волумен пропорционално на ПЦР реакције који је оптимизиран или добро ради, генерално ћете повећати количину производа са повећањем волумена. Exceptions to this include older mineral oil PCR machines and PCR thermocyclers without a heated-lid. Изузеци на ово укључује старе минерално уље ПЦР и ПЦР машине тхермоцыцлерс без грејних-поклопца. In these cases, increasing the PCR reaction volume will negatively affect the PCR product and efficiency of the reaction. У тим случајевима, чиме се повећава ПЦР реакције волумен ће негативно утицати на ПЦР производ, а перформанс реакција.
PCR Primer Design ПЦР фитиљ дизајн
Primer are usually chosen to be between 18-25 nucleotides in length. Фитиљ се обично изабрао да се између 18-25 нуклеотидима у дужини. Longer primers also work 30-40 nucleotides or bp during pcr Дуже почетници и радити 30-40 нуклеотидима или БП време ПЦР
A GC clamp at the 5' ends of the primers helps. А ГЦ спајати на 5 'завршава за почетници помаже.
One can thus design primers with 1 or 2 nucleotides GC at the start and ends of the primers if possible Један може овако дизајн почетници са 1 или 2 нуклеотидима ГЦ на почетак и крај ако је могуће на почетници