Obrnut PCR
Obrnut PCR pozadina
Obrnut PCR isto zvan IPCR, pa je prvo predstavljen kod Ochman i suradnici. unutra 1988 (1).
JEDAN ograničenje nad standard PCR 3. lice od TO BE u prezentu taj 5' pa 3' bočni predeo nad tvoj DNA- fragment nad zanimanje morati postojati poznat. Obrnut PCR dopustiti te za voditi PCR našto te jedini imati određeni član obaveštenje nad pojedinac unutarnji sled.
Obrnut polimer lanac otpor 3. lice od TO BE u prezentu jedan različit nad PCR, pa je korištena našto jedini unutarnji sled nad određeni član cilj DNA- 3. lice od TO BE u prezentu poznat. To 3. lice od TO BE u prezentu stoga vrlo koristan unutra identifikacijski bočni DNA- sled nad genomic umetnuti. Poput ostali PCR metod, obrnut PCR povećan cilj DNA- pomoću DNA- polimer.
Obrnut PCR uses standard PCR ( polimer lanac otpor), unatoč tome to je određeni član example orijentiran unutra određeni član obratna pravac nad određeni član običan orijentacija. Određeni član šablona umjesto određeni član obratna example 3. lice od TO BE u prezentu jedan ograničenje fragment taj je bila spajati nato ono samo za oblik jedan okružiti.
Određeni član Obrnut PCR Metod
Određeni član obrnut PCR metod uključiti jedan serija nad varenje pa samopregor- vezanje s određeni član DNA- bude rez kod jedan ograničenje endonuclease. Današji rez rezultat unutra jedan poznat sled kod oba kraj nad nepoznat sled.
Obrnut PCR Skaline
1) Cilj DNA- 3. lice od TO BE u prezentu olako načeti komparativ od SMALL fragmenti nad nekoliko kilobases kod ograničenje endonuclease varenje.
2) Samopregor- vezanje 3. lice od TO BE u prezentu naveden ispod dubok koncentracija prouzročenje određeni član fosfat kičma za reforma. Današji davati jedan kružni DNA- vezanje proizvod.
3) Cilj DNA- 3. lice od TO BE u prezentu onda ograničenje provariti s jedan poznat endonuclease. Današji roditi jedan rez u kući određeni član poznat unutarnji sled roditi jedan pravolinijski proizvod s poznat koji čini među sled. Današji moći zatim biti korišten umjesto PCR ( polimer lanac otpor).
4) Standard PCR 3. lice od TO BE u prezentu proveden s example komplementarni za određeni član zatim poznat unutarnji sled.
Unutra kratak pregled:
Obrnut PCR delovanje za klon sled bočni jedan poznat sled. Bočni DNA- sled biti provariti i tada spajati za roditi kružni DNA-.
PCR example pokazati dalje od određeni član poznat sled biti onda zaposlen za povećati određeni član bočni sled.
Aplikacija nad Obrnut PCR
Obrnut PCR je brojan aplikacija unutra molekularni biologija uračunavši određeni član širenje pa prepoznavanje nad sled bočni premještanje počevši, pa određeni član prepoznavanje nad genomic umetnuti.
Obrnut PCR Protokol
Obrnut PCR Radni broj
1. Ochman H, Gerber Ace, Jelen s deset parožaka DL. Genetika. 1988 Nov1203621;():-3.