PCR PCR Uklanjanje pogreške

PCR Problematika pa Rešenje, PCR Pomoć

Što je to tvoj PCR problem?:

Dug Ne- specifičan PCR proizvod?

Example Kovani novac od deset centi formacija?

Problem:

dug Ne- Specifičan Proizvod unutra PCR

Našto trčanje dobro srndakuša gel te tačka lark ne- specifičan PCR glazbenik taj nisu određeni član pravo veličina.

Rešenje čeznuti za kim Ne- specifičan Proizvod unutra PCR:

Smanjenje kaljenje vrijeme

Smanjenje produžetak vrijeme

Smanjenje produžetak temperatura za 62-68º U C

Porast KCl ( odbojnik) koncentracija za 1.2x-2x, ipak držati MgCl2 koncentracija kod 1.5-2mM

Porast MgCl2 koncentracija spreman 3-4.5 mm ipak držati dNTP koncentracija nepromenjiv.

Korist manji example

Uzeti manji DNA- šablona

Uzeti manji Taq polimer

Da ništa nad određeni član iznad utvrde: provjeriti određeni član example umjesto ponavljajući sled ( minirati poredati određeni član sled s određeni član tipka za baze podataka) pa presvući example()

Kombinacija nad nekakav/ svi nad određeni član iznad.

 

Problem:

PCR Example Kovani novac od deset centi

Našto trčanje dobro srndakuša gel, te tačka nekakav vrlo malen PCR glazbenik. Ovih biti određeni član veličina nad tvoj example inače okolo određeni član veličina nad oba tvoj example ( jedan pa P) zajedno. Ovih biti rok " example kovani novac od deset centi" pa biti izvještačen kod određeni član kaljenje nad tvoj example s ono samo inače s onaj drug example.

Rešenje za example kovani novac od deset centi unutra PCR:

Korist manji example.

Re- nacrt example pa niz jedan nov hrpa. Osigurati te korist example nacrt softver pa provjeriti umjesto samopregor- kaljenje pa taj određeni član example ne udeo jedan velik postotak nad komplementarni sled. Provjeriti example oprezno umjesto homo- kovani novac od deset centi pa koji je druge vjere- kovani novac od deset centi formacija s OligoAnalyzer

Voditi PCR s pa van formamide.

Titriranje Mg2+ (MgCl 1.5, 2.0, 2.5 pa 3.0 mm) koncentracija.

Porast DNA- šablona količina ( koncentracija).

Porast kaljenje temperatura ( probati optimizing pomoću jedan uspon PCR mašina za naći optimalan temperatura umjesto kaljenje).

Probati dodavanje DMSO spreman 5%.

Probati pomoću HotStart PCR umjesto pravilan Taq polimer PCR.

 

Kombinacija nad nekakav/ svi nad određeni član iznad.