Conditions and Factors Affecting PCR Mga kondisyon at mga kadahilanan nakakaapekto sa PCR
Factors Affecting PCR: Mga kadahilanan nakakaapekto sa PCR:
PCR Reaction Volume PCR reaksyon ng lakas ng tunog
If you are increasing the PCR reaction volume proportionally to a PCR reaction that is optimized or works well, in general you will increase the amount of product with increasing volume. Kung ikaw ay patuloy na dumarami ang PCR reaksyon dami proportionally sa isang PCR reaction na-optimize o gumagana ng mabuti, sa pangkalahatang mo ay taasan ang halaga ng mga produkto sa pagdaragdag ng lakas ng tunog. Exceptions to this include older mineral oil PCR machines and PCR thermocyclers without a heated-lid. Eksepsiyon sa mga ito isama ang mga mas lumang mga langis mineral PCR makina at PCR thermocyclers nang walang pinainit-talukap ng mata. In these cases, increasing the PCR reaction volume will negatively affect the PCR product and efficiency of the reaction. Sa mga kaso na ito, madaragdagan ang PCR reaksyon ng lakas ng tunog ay negatibong makakaapekto sa PCR produkto at kahusayan ng reaksyon.
PCR Primer Design PCR panimulang aklat Design
Primer are usually chosen to be between 18-25 nucleotides in length. Panimulang aklat ay karaniwang pinili upang maging sa pagitan ng 18-25 nucleotides sa haba. Longer primers also work 30-40 nucleotides or bp during pcr Na primers din sa trabaho 30-40 nucleotides o BP sa oras pcr
A GC clamp at the 5' ends of the primers helps. Isang GC salansan sa 5 'dulo ng primers tumutulong.
One can thus design primers with 1 or 2 nucleotides GC at the start and ends of the primers if possible Isa maaari kaya disenyo ng primers sa 1 o 2 nucleotides GC sa simula at natatapos ng primers kung maaari