在原处PCR
在原处PCR的定义
在原处PCR (ISH)是实际上发生在幻灯片的电池里面的聚合酶链反应。 在原处PCR放大作用在固定的组织或电池可以执行。
在原处PCR简介
在疾病期间启动和累进，一个产品的极少量在电池的小的人口的或组织可能是对疾病的发病原理至关重要。
在需要几个月甚至几年临床表明自己的许多慢演变的疾病，显示受影响的电池人口的大部分是在一个transcriptionally非活动状态，和在一个基因的级别每个寄主细胞。
核酸杂交方法和聚合酶链反应(PCR)在发病原理期间，两个被使用检查表达式和检测的这样受影响的基因。 当这两个技术是相当有用的时，这些技术的缺点是他们根本执行电池表达式和人口研究。 核酸与包含分子的一个满足的编号检测直接地用标准杂交技术电池的人口，或者，当亚人口包含作为一点作为核酸的一个单一副本，在放大作用以后时放大由PCR和被检测的该分子查出。
在原处杂交(ISH)适用核酸杂交技术的方法于蜂窝电话级别。 结合细胞化学和immunocytochemistry，在原处PCR允许蜂窝电话标记的确定被识别和进一步允许对在电池人口之内的电池特定顺序的本地化，例如组织和血样。
因为检测极限在多数的情况下是目标核酸的几个复制每个电池，在原处PCR被限制到non-genomic材料的检测例如核糖核酸、基因或者染色体。 所以，由于复制号码限制，核糖核酸的杂交比脱氧核糖核酸检测敏感。
影响在原处PCR区分的系数包括：
1)目标分子的strandedness
2)缺乏一个补充顺序接近对目标顺序
撤消transcriptase摧化的在原处副本甚而使用检测发生在相对地高复制号码的RNAs。
在原处PCR (ISH) Protcol
最初核酸要素的化学计量学做初级读本被驱动的回应。 然而当回应进行， PCR产品开始功能作为进一步放大作用的一个目标，并且进一步伸长的一个初级读本。 它是由固定的电池保留并且作为放射形同位素示踪的探测的目标在检测阶段在多个回应延长的顺序的累计。
在一个固定的电池之内的复杂物理性质妨碍聚合酶的效率并且扩散和焖火，并且因而伸长时间比在含水(标准PCR)情况下执行的那些长。 使用15周详伸长，最佳信号通常producted。