PCR初级读本
PCR初级读本的定义:
PCR初级读本是短的single-stranded,综合被综合的低聚核苷酸通常短的比50核苷酸(经常18-25核苷酸)。
PCR初级读本的应用
PCR初级读本是重要的,虽然他们是补充的对脱氧核糖核酸片段的期初和结束利益哪个需要放大。 因此初级读本选择区域的限定范围由PCR放大。 在PCR焖火循环期间, PCR初级读本锻炼对脱氧核糖核酸的补充区域。 脱氧核糖核酸聚合酶捆绑和3 ' OH oligo允许脱氧核糖核酸综合发生。

选择PCR初级读本
要考虑的重要因素,当选择初级读本时:
- 最佳的Tm (焖火T) ~ 50-60°C
- 低聚核苷酸GC目录应该在40-60%之间。
- 被计算的Tm (熔化的温度)用于回应的两个初级读本的不应该有所不同>5°C。
- 初级读本焖火温度通常是5°C在被计算的更低的Tm之下。 然而应该为各自的情况经验为主地选择它。
- 应该避免>4内在自补充簪子和二聚体>8。
- 3 '终点非常区分大小写-不能是补充的对用于回应的另一个初级读本的任何区域,并且必须提供配比对模板的正确的基础。
- 若可能,初级读本应该启动和与1-2 G或C残滓的末端
- 初级读本不应该有任何extendisve二级结构或自互补性(能导致初级读本二聚体)。
PCR初级读本设计
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